Hva er Actin antistoffer?

Actin antistoffer brukes til å oppdage tilstedeværelsen av proteinet aktin. Det brukes bare for de formål av biologisk eller medisinsk forskning, eller i diagnostiske laboratorier patologi. Actin er studert det meste av forskere som undersøker muskel eller andre tilknyttede systemer, for eksempel cytokinese eller proteiner. Men fordi det er den mest tallrike protein i eukaryote celler --- mer komplekse celletyper som inneholder interne strukturer som kalles organeller --- det er ofte brukt som en positiv kontroll for eksperimenter fokusert på andre typer proteiner. Actin

protein aktin er svært strengt, eller "høyt", konservert gjennom ulike organismer, fra alger og bakterier til hunder og mennesker. Det eksisterer som enkelt protein enheter, eller monomerer, som må slås sammen for å danne større, globular protein. Aktin er nødvendig å gjøre filamentene i celler for cellenes bevegelse så vel som for bevegelse av organeller inne i cellen. Det er derfor viktig for grunnleggende cellulære prosesser, for eksempel motilitet og celledeling.
Områder i forskning ved hjelp Actin Antistoffer

Actin antistoffer er blant de mest rutinemessig og allment brukt cellebiologi verktøy. Deres søknad til eksperimenter ved hjelp av immunhistokjemi, western blotting, immunoprecipitation, ELISA og flowcytometri, har en lang, veldokumentert historie om suksess. De fleste selskaper som produserer og selger antistoffer for forskningsformål produsere primære antistoffer som kan knyttes til en farget eller fluorescerende molekyl, eller som må bli gjenkjent av en sekundær antistoff knyttet til ett av disse synlige molekyler.

Actin antistoffet i Immunohistochemistry og Immunnocytochemistry

Actin er en viktig del av cellens messenger ribonucleic produksjon, så det er vanligvis til stede i store mengder i kjernen. Dens nærvær her kan anvendes som en positiv kontroll for IHC eller ICC eksperimenter. Actin er oppdaget ved hjelp antistoffer som gjenkjenner sine enkelte aminosyrer. Den visuelle observasjon at aktin antistoffer er oppdaget beviser at protokollen som brukes er riktig utført eller formulert. Farging med aktin antistoffer fungerer som en positiv kontroll for andre antistoffarging å oppdage andre typer proteiner, enten for forskning eller medisinske diagnoser.
Actin antistoffet i Western Blotting

Western blot er en metode for påvisning og kvantifisering protein hjelp av vitenskapelige fremgangsmåter, såsom gel-elektroforese, og immunoblotting antistoff hybridisering. Proteinet av interesse og aktin-proteinet electrophoresced gjennom en gel, noe som gjør det mulig for proteiner av forskjellige størrelser for å separere langs en størrelse gradient. De enkelte proteiner blir deretter overført til en spesiell membran, hvor de blir immobilisert. Actin-antistoffer anvendes til membranen for å påvise den immobiliserte protein aktin, igjen tjener som en positiv kontroll for påvisning av proteinet av interesse. Fordi en kjent masse av aktin protein er vanligvis brukes, er det mulig å sammenligne dette tallet til den av protein av interesse og dermed bestemme dens kvantitet.
Actin antistoffet i immunoprecipitation

Igjen, fordi aktin antistoffer er så rutinemessig brukt og godt undersøkt, det er deres unike evne til å binde seg strengt til aktin og deres kjent størrelse eiendom utnyttes som positive kontroller i immunoprecipitation eksperimenter. Interaksjoner som oppstår inne i en celle kan studeres ved Lysing cellen --- tilrettelegge sin oppløsning --- og samle den resulterende lysatet, som er egentlig en "suppe" av ulike proteiner. Ved å binde antistoffer mot et protein av interesse og aktin, og deretter påføre blandingen på en kolonne, er det mulig å rense antistoff-bundet protein og antistoff-bundet aktin fra andre uønskede proteiner. Påvisning av aktin proteiner av actin antistoff fungerer som bevis på at immunoprecipitation prosedyren var vellykket.