Protokoller for Hoechst Farging

De Hoechst flekker er fluorescerende fargestoffer som brukes for merking DNA og RNA gjennom fluorescens mikroskopi og flowcytometri teknikker. Hoechst 33258 og Hoechst 33342 er den mest brukte av disse flekkene. De har evnen til å binde til DNA-molekyler, slik at kjerner og mitokondrier å vises fluorescerende under ultrafiolett lys. Protokoller for Hoechst flekker er vanlig praksis i bioteknologisk og genetikk laboratorier, og inkluderer cellefarging teknikker ved hjelp av både Hoechst 33258 og Hoechst 33342. Hoechst 33342 HSC Flekker og Stem Cell Rensing Protocol

Denne protokollen brukes til å farge celler fra mus benmargen. Teknikere forberede benmarg prøven med HBSS + salt-løsning, HEPES-buffer og kalvefosterserum. De spinner løsningen og legge til en forvarmet DMEM medium. Hoechst flekk blir deretter tilsatt. Løsningen anbringes i en 98,6 grader Fahrenheit vannbad i nøyaktig 90 minutter, rapporterer Department of Immunology ved University of Pittsburgh. DNA-segmenter vises fluorescerende under en cytometer.
Hoechst 33342 DNA Farging

løpet av denne protokollen, teknikere suspendert Hoechst 33342 flekk i destillert vann, tilsett 2 prosent kalvefosterserum til cellen prøven, mens pH ble holdt på 7,2 ved hjelp av en buffer-oppløsning. Cellene blir deretter inkubert ved 98,6 grader C i en time, og umiddelbart analysert med en utrustning kalt cytometer.

Stained DNA er så synlig og fluoriserende, ifølge University of Michigan Health System.


DNA Detection Bruke DNA-bindende fluorokrom Hoechst 33258

Dette protokoller brukt en del av utstyret som heter spektrofotometer å analysere DNA og RNA segmenter. Teknikere bruke Hoechst 33258 fungerende løsning og kalv thymus DNA-prøver. De gjør også en adskilt løsning ved hjelp av DNA-prøve og en kjemisk kalt etidiumbromid. Senere, sammenligner de cellefarging resultater både i media, ved hjelp av et spektrofotometer, ifølge Dagens Protokoller i Cytometry.