Hvordan isolere Sopp Fra Mixed Flora

Fungi må isoleres fra den forurensende innflytelsen av de ville blandet flora av sopp habitat. Når atskilt fra andre livsformer som overgrow, svekke eller drepe sopp, er den klar til å bli dyrket som rene stammer i en kontrollert laboratorium evironment. Noen av de konkurrerende flora vokse raskere enn sopp og sluke sin matforsyning. De blandet flora, kalt urfolk microbiota av forskere, inkluderer protister, bakterier, andre ikke-ønskelige arter av sopp og gjær. Du trenger
Clean-rom
Inoculation boks
Luftrenser
Latex hansker
Kirurgisk maske
Isopropanol
Agar mix
Vann
Autoklaverbart container
petriskåler
Scalpel
trykkoker
Wild sopp befolkningen
Plastpose
Jod løsning
Alkohol lampe
Vis flere instruksjoner
1

Sett opp og utstyre en ren plass til å vokse sopp du ønsker å isolere og rense fra de blandede flora forurensinger av sitt ytre miljø. Velg et nymalt rom med lite luftsirkulasjon. Bruk rene klær og dusj før du arbeider med sopp kulturer. Installer en luftrenser. Hindre forurensning ved iført gummihansker og maske. Spray hanskene ofte med isopropanol. Holde nivået av blandet flora organismer lavt i rommet.
2

Klargjør agar media til å vokse sopp under isolasjon og renselsesprosess. Følg instruksjonene på beholderen for å oppløse tørr agar i vann i en autoklaverbart container. Stable petriskåler, skalpeller og agar inne i en trykkoker. Sterilze ved koking i 25 minutter ved 15 psi. Avkjøl komfyr og plassere retter og verktøy i en innsprøytning boks med glasslokk og hull i front for hendene. Hell agar inn oppvasken mens det er varmt. Fylle dem halvveis.
3

Finn en sopp befolkning du ønsker å isolere. Velg en ren fruiting kroppen, kjent som en carpophore. Ta på sterile hansker, samle carpophore og legg den i en ren plastpose. Ta det med til laboratoriet og sette den på en steril overflate. Desinfiser carpophore huden med en jod og alkohol løsning. Skjær ut små seksjoner fra innvendig etter peeling tilbake huden. Plassere brikkene i sentrum av petriskåler.
4

Flame skalpell med en lab alkohol lampe etter flere stiklinger å sterilisere den. Juster temperatur og luftfuktighet til den spesielle typer sopp være isolert. Observere sopp som det vokser ut i mediet fra blings. Klipp ut og kast eventuelle områder kolonisert av konkurrerende sopp. Dumpe kultur hvis gjær, pytter av bakterier eller svart og grønn mugg ta over. Identifisere og rense sopp kulturer av eventuelle uønskede blandet flora.
5

Fortsett å isolere sopp du ønsker å vokse fra forurensningen flora. Skjær ut trekanter av agar overgrodd med ren sopp kultur i petriskåler. Plukke deler langt fra noen voksende forurensninger. Stab trekanter med skalpell og overføre hver del til en ny rett av agar. Gjør dette til kun rene isolert sopp kulturer er observert økende.